在色谱鉴别试验中，利用对照品对色潜分离物进行鉴别是最常用的色谱定性方法。其原理基于相同的化台物在相同的色谱条件(流动相组成、色谱柱和柱温等)下，具有完全相同的特定色
谱保留行为。通常在相同的色谱条件下，如果被测化台物和对照品具确相同的保留值，就可以初步认为，被测化台物与对照品为相同物质。药典等药品质量标准中的色谱鉴别法都足以此为依据的。宴际测定中，应首先分别测定对照品和供试品的色谱保留时间。宴践中可能会遇到多种情况，现举例分别介绍如下：
注意：当实验中初步发现供试品和对照品的保留时间略冉不同时．首先应确定这种差异不是由于供试品和对照品的组成、浓度等的差异所致。简单的排除方法是将供试品和对照品等比例混合进样，观察在相同色谱条件下是否能分离出两个色谱峰。如确有两个色谱峰出现，则可吼肯定供试品和对照品的保留时间不同，反之，不能肯定两者的保留时间不同。
严格地说，根据某一特定色谱条件下供试品和对照品的保留时间相同．就判断两者为相同物质仍具有一定的风险性。如需要进一步确定供试品和对照品相同，应根据对照品的特性，选择不同的色
谱条件(通常选挣不同的流动相)，进一步比较供试品和对照品在不同色谱条件下保留值的变化是否相同。如对有机酸碱化合物，应比较流动相pH值在其曲左右变化时保留值的变化；对非极性化舍物．应比较其保留值随流动耜强溶剂改变的变化规律。如果多次改变流动相的组成，供试品和对照品的保留值均完全一致，则可进一步肯定供试品和对照品为相同物质。
